LSM980共聚焦显微镜实例展示
发布时间：2022年05月09日
作者：何小蝶
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激光共聚焦扫描显微镜是利用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理共和装置，并利用计算机对所观察分析对象进行数字图像处理的一套观察、分析和输出系统。
相比于LSM700，LSM980配备了高灵敏度GaAsP检测器、电动载物台和Airyscan2配备32阵列检测器，实现高速超分辨成像，对于我们所更推荐使用980拍摄原生质体。
LSM980配备的物镜：5×（NA 0.16）、10×（NA 0.45）、20x（NA 0.8）；40×（NA 0.95）、63x 油镜（NA 1.4）
荧光定位实图展示：1、 双分子荧光互补（BiFC）：指通过具有相互作用亲和力的两个蛋白质，将分别与其相连的荧光蛋白片段拉近，组装成完整的荧光蛋白，从而表征蛋白质相互作用的发生及其空间位置(如图1）。
图1 利用水稻原生质体进行双分子荧光互补
2、亚细胞定位：亚细胞定位是查找生物大分子在细胞内的具体存在的位置，如在核内、胞质内或者细胞膜上存在（如图2）。
图2 利用水稻原生质体进行亚细胞定位
3、 三维图像采集和重构：在共聚焦或超分辨率模式下对组织切片、细胞样品进行连续Z轴（Z-stack）光学切面多色荧光成像，并可进行三维重构，从而获得精细的单个细胞或组织切片的各个层面结构的三维图像（如图3）。
图3 水稻根被菌丝侵染的显微“CT”
4、 三维图像重建:对样品进行显微“CT”后，通过软件将所得图像进行三维重建。