LSM700共聚焦显微镜实例展示
发布时间：2022年05月09日
作者：何小蝶
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激光共聚焦扫描显微镜是利用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理共和装置，并利用计算机对所观察分析对象进行数字图像处理的一套观察、分析和输出系统。
LSM700物镜： 10×（NA 0.45）、20x（NA 0.8）、25x 水镜（NA0.8）、40×（NA 0.75）、63x 油镜（NA 1.4）、100 x 油镜（NA 1.4）
LSM700共聚焦由于配备了25x 水镜（NA0.8）更适合看植物细胞内部结构。荧光定位实例展示：
1、 双分子荧光互补（BiFC）：指通过具有相互作用亲和力的两个蛋白质，将分别与其相连的荧光蛋白片段拉近，组装成完整的荧光蛋白，从而表征蛋白质相互作用的发生及其空间位置（如图1）。
图1 利用烟草体进行双分子荧光互补
2、 亚细胞定位：亚细胞定位是查找生物大分子在细胞内的具体存在的位置，如在核内、胞质内或者细胞膜上存在（如图2）。
图2 利用烟草进行亚细胞定位
3、三维图像采集和重构：在共聚焦或超分辨率模式下对组织切片、细胞样品进行连续Z轴（Z-stack）光学切面多色荧光成像，并可进行三维重构，从而获得精细的单个细胞或组织切片的各个层面结构的三维图像（如图3）。
图3 烟草细胞的显微“CT”
4、三维图像重建:对样品进行显微“CT”后，通过软件将所得图像进行三维重建。